菜薹雄性不育相关基因的ISSR分子标记筛选

菜薹(Brassica campestris L.ssp.Chinensis var.utilis Tsenet Lee)属于十字花科芸薹属,原产中国,是华南地区重要的特产蔬菜之一.利用分子标记技术进行菜薹雄性不育相关基因的定位对菜蕞品质创新和选育新品种具有重要意义.目前尚未见有利用ISSR分子标记技术进行菜薹雄性不育分析的研究报道.利用ISSR技术对菜薹雄性不育系及其保持系的基因组DNA进行比较分析:结果显示100个ISSR引物中,只有引物UBC843的扩增结果在两系之间表现出了差异性,找到了不育系和保持系间的特异扩增片段.回收该特异扩增片段并进行克隆测序,测序结果表明该片段全长为462 bp.与白菜其它育性相关序列比较,同源性均低于50%.根据测序结果设计了一对特异引物,将其转化为更稳定的SCAR标记.经F2群体验证,ISSR引物扩增得到的特异片段很有可能来自核DNA.     

淮南黄心乌在菏泽最佳播种期、产量及营养品质研究

为了丰富菏泽地区冬季蔬菜的种类,增加市场供给,进行淮南黄心乌引种试验,研究不同播种期对淮南黄心乌农艺性状、单株产量和营养品质的影响,不同施肥处理对其单株产量和营养品质的影响,移栽苗龄对其缓苗时间和单株产量的影响。结果表明:随着播种期的推迟,株高、株幅、叶片长、叶片宽、叶柄长和单株产量呈现先降低后增加的趋势,叶柄宽、叶片数呈现先增加后降低再增加的趋势,可溶性糖呈现先升后降的趋势,蛋白质呈下降趋势,硝酸盐和Vc无明显变化规律;在8月25日、9月5日播种,黄心乌单株产量、蛋白质含量极显著高于其他播种期,单株产量分别为511.16、500.08 g,蛋白质含量分别为6.27、6.50 mg/g,且硝酸盐含量较低,分别为342.87、357.66 mg/kg,9月5日播种,黄心乌Vc含量为32.34 mg/100g,显著优于其他播种期。有机肥(O)、有机肥+氮肥(ON)、有机肥+复合肥(OM)处理单株产量、可溶性糖和蛋白质显著优于不施肥对照,OM处理单株产量、蛋白质含量最高,分别为520.15、6.79mg/g,但是硝酸盐显著低于ON处理。6叶、8叶期苗龄缓苗时间较短,为4 d,且单株产量较高,分别为518.72、519.06 g。从农艺性状、单株产量、营养品质综合分析,淮南黄心乌在菏泽的最佳播种时间为8月25日至9月5日,最佳施肥处理为有机肥+复合肥,最佳移栽苗龄为6~8叶期。     

菜薹花芽分化及BrcuFLC基因的克隆与表达

通过制作石蜡切片研究了菜薹(Brassica campestris L. ssp. chinensis (L.) Makino var. utilis Tsen et Lee)早熟品种‘油青49’和晚熟品种‘油青甜菜心80天’的花芽分化过程,结果表明,当展开2~3片真叶时花芽分化开始启动。用已报道的拟南芥Flowering locus C (FLC) 基因和FRIGIDA (FRI) 基因的保守区域设计引物,通过RT-PCR的方法从两个菜薹品种中均克隆得到了两个决定开花的关键基因,并命名为BrcuFLC (GenBank登录号为EF138603)和BrcuFRI (GenBank登录号为EU700362)。半定量式RT-PCR表达分析表明, BrcuFLC基因在早、晚熟菜薹品种的不同发育时期表达存在差异,表达量随真叶数增加而逐步减少,但在晚熟品种中BrcuFLC表达量降低幅度小;BrcuFRI则在早、晚熟品种的所有阶段表达都较低。BrcuFLC在菜薹不同部位表达的情况不同,在茎、叶中的表达强,花次之,根中表达较弱;而BrcuFRI在早、晚熟品种根中的表达量明显高于其它3个部位。     

茎瘤芥(榨菜)新品种渝直80的选育

渝直80是以茎瘤芥与甘蓝型油菜天然远缘杂交株为材料,利用优良自交系郫县榨菜连续回交7代以上再自交,创制的茎瘤芥稳定新品系。该品种中早熟,株型直立紧凑,耐密植,瘤茎扁圆形、肉瘤钝圆,皮色淡绿,间沟浅,平均单个瘤茎鲜质量500~600 g,茎叶比1.3~1.6,皮薄筋少,耐空心,粗蛋白含量(以干基计)33.29%,含水量低,脱水速度快,鲜食加工均可,加工成菜率和品质与永安小叶相当,宜直播栽培,667 m²种植6000~7000株;育苗移栽8000~9000株/667 m²,一般产量3000~3500 kg/667 m²,高产可达4000 kg/667 m²。可在重庆市榨菜主产区海拔500 m以下主要作榨菜加工原料栽培。     

脯氨酸对高温胁迫下菜薹耐热性的影响

以50天油青菜心为试材,研究了不同浓度脯氨酸处理对菜薹苗期及田间耐热性的影响。苗期试验结果表明,随着高温胁迫时间的延长,菜薹幼苗的热害指数、电解质渗透率不断增高,高温胁迫8～12 h,脯氨酸浓度在150～200 mg•L-1处理的热害指数、电解质渗透率降幅明显,超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性增幅明显|田间试验结果表明,脯氨酸浓度在150～200 mg•L-1处理可明显促进叶片生长,增加叶面积、薹鲜质量和根鲜质量,以及提高可溶性糖、可溶性蛋白和VC含量。结果表明脯氨酸能增强菜薹的抗氧化能力和维持渗透调节能力,从而缓解高温胁迫对菜薹的伤害。     

白菜核雄性不育两用系花蕾的mRNA差别显示及其cDNA差异片段分析

用mRNA差别显示技术对白菜核雄性不育两用系中不育株群与可育株群花蕾总RNA进行了比较分析.在6种反转录模板和20种差异随机引物共120种组合的选择扩增中共回收了18个cDNA差异片段,对其中6个cDNA差异片段进行Northern验证,获得了一个白菜核雄性不育两用系可育株群并在花蕾中特异表达的阳性差异片段,简称为B0302-4.Northern验证结果表明它在不育株中的表达受到了明显的抑制,其长度为463 bp.经GenBank BLAST查询,它与拟南芥第一条染色体上编码细胞色素P450的基因CYP86C4核苷酸序列有84.3%的同源性.     

不同榨菜(茎瘤芥)雄性不育资源的育性鉴定

对2份来源不同的榨菜雄性不育材料(涪杂1号×冬榨1号、T84-66A×桐农3号)和3份雄性可育材料(冬榨1号、桐农3号、冬榨1号×桐农3号)的雄性不育性进行了鉴定.试验结果表明,与3份雄性可育材料相比,2份雄性不育材料的花蕾、花朵均较小,花序上花朵分布密度较低,而且雄性不育材料开花前存在柱头外露现象,花朵能够开放,但不...     

Nitrogen Dioxide-Induced Responses in Brassica campestris Seedlings： The Role of Hydrogen Peroxide in the Modulation of Antioxidative Level and Induced Resistance

This article investigates the responses of Brassica campestris seedlings to an acute level of nitrogen dioxide (NO₂) exposure in a plant growth chamber, and examines whether pretreating plants with hydrogen peroxide (H₂O₂) will alleviate NO₂-caused injury. Twenty-eight-day-old B. campestris plants sprayed with 10 mmol L⁻¹ H₂O₂ aqueous solution (corresponding to approximate 1.0 mg H₂O₂ per single plant) were exposed to different concentrations of NO₂ (0.25, 0.5, 1.0, and 2.0 μL L⁻¹, respectively) for 24 h under controlled environment. To measure the plant biomass, the plants were fumigated with the same NO₂ concentrations as mentioned above for 7 h per day (8.00-15.00) for 7 days. As a control, charcoal filtered air alone was applied. Data were collected on plant biomass, total chlorophyll, photosynthetic rate, stomatal conductance, nitrate and nitrate reductase (NR), antioxidative enzymes, ascorbate (ASA), and malondialdehyde (MDA), immediately after exposure. The results showed that exposure to a moderate dose of NO₂ (e.g., 0.25 μL L⁻¹) had a favorable effect on plants, and the dry weight of the above-ground part increased, whereas the exposure to high NO₂ concentrations (e.g., 0.5 μL L⁻¹ or higher) caused a reduction in the plant biomass and the total chlorophyll, when compared with the control. In addition, at 0.5 μL L⁻¹ or higher NO₂ concentrations, prominent increases in the MDA level and superoxide dismutase (SOD) and NR activities were observed. Exposure to 1 μL L⁻¹ and higher NO₂ resulted in necroses appearing on older leaves, and an increase in catalase (CAT) activity, decrease in ASA content, increased accumulation of NO₃, and reduction in photosynthesis, when compared with the controls. No changes were detected in stomatal conductance under NO₂ fumigation. The pretreatment with 10 mmol L⁻¹ H₂O₂ alleviated significantly NO₂-caused biomass decrease and photosynthetic inhibition when compared with H₂O₂-untreated plants. Under NO₂ fumigation, further induction in SOD and CAT activities occurred in H₂O₂ treated plants when compared with H₂O₂-untreated plants. The effect of NO₂ on the ASA and MDA contents was also absent in H₂O₂-treated plants. However, the H₂O₂ treatment did not alter the nitrate content and NR activity in plants under NO₂ fumigation. The H₂O₂ treatment caused a lower rate of stomatal conductance. Taken together, these data suggest that fumigation with an acute level of NO₂ causes oxidative damage to B. campestris seedlings. The H₂O₂ pretreatment markedly protects plants against NO₂ stress and this may be associated with inducible antioxidative level. NO₂ fumigation contributes, at least in part, to the enhanced levels of nitrate in B. campestris leaves.     

茎瘤芥瘤茎增长过程的研究

以茎瘤芥涪杂1号为试材,研究了瘤茎膨大后瘤茎性状的变化过程。结果表明:用Logistic方程y=k(1+e(a+bt)-1能很好地描述瘤茎纵径、横径、鲜样质量、干样质量的增长过程,而菜形指数的变化过程符合二次回归方程)y=a+b1t+b2t2。瘤茎纵径、横径、干样质量、鲜样质量线性增长始期分别出现在膨大后2.1-9.6d、17.8-19.7d、45.7～48.0d、46.0～50.5d,线性增长持续时间分别为61.6-78,1d、56.1～70.6d、32.9～34.8d、31.6～35.2d;增长高峰期出现在膨大后32.9-48.7d、45.8-55.0d、63.1～64.5d、63.5-66.3d,其最大增长速率分别高达每株每天0.17cm(纵径)、0.16cm(横径)、1.05g(Dw)、16.24g(Fw)。播种晚则瘤茎横径线性增长持续时间短,纵径、干鲜质量增长速率低,而菜形指数的变化由慢到快的递增演变为由快到慢的递减。     

菜薹-芥蓝单体异附加系n+1配子传递及两个二体异附加系的获得

【目的】研究菜薹-芥蓝单体异附加系n+1配子传递,为其在基因定位和遗传改良上的应用奠定基础。【方法】通过观察和统计各单体异附加系减数分裂后期Ⅱ10/10/11/11分离的PMCs,估算n+1配子的形成频率;通过鉴定回交子代植株的染色体数目,测定各单体异附加系n+1配子的传递率;从单体异附加系的自交子代中筛选二体异附加系。【结果】依据减数分裂后期Ⅱ10/10/11/11分离的PMCs比率估算,各单体异附加系n+1雄配子的形成频率在36.85%—45.15%;基于染色体数目鉴定,各单体异附加系n+1雄配子的传递率在7.14%—14.81%,雌配子在19.70%—36.51%;在一定范围内,n+1配子传递率与n+1配子形成频率、染色体大小、花粉量和花粉生活力没有显著的相关性;从自交子代中获得了两个不同的二体异附加系。【结论】菜薹-芥蓝各单体异附加系的额外染色体通过雌、雄配子均能进行传递,但传递率因不同的附加系而异;从单体异附加系的自交子代中可以分离出遗传性稳定的二体异附加系。